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Annexin V/FITC 凋亡检测试剂盒 50T

Annexin V/FITC 凋亡检测试剂盒 50T

型    号: abs50001b
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AIBIXIN(absin)DEAnnexin V/FITC DIAOWANGJIANCESHIJIHE 50T,ZHILIANGYANZHENGBIAOMINGJUYOUHENHAODEKEKAOXINGJIWENDINGXING。WOMENTIGONG25T、50TGUIGEKEYIXUANZE,XIANHUOZHIJIEFAHUO。

abs50001bAnnexin V/FITC 凋亡检测试剂盒 50T的详细资料:

概述
描述

ZAIZHENGCHANGXIBAOZHONG,LINZHIXIANSIANSUANZHIFENBUZAIXIBAOMOZHIZHISHUANGCENGDENEICE,XIBAOFASHENGDIAOWANGzuiZAOQI,MOLINZHIXIANSIANSUAN(PS)YOUZHIMONEICEFANXIANGWAICE,ZHEIYIBIANHUAZAOYUXIBAOZHOUSUO、RANSEZHINONGSUO、DNADEPIANDUANHUAHEXIBAOMODETONGTOUXINGZENGJIADENGDIAOWANGXIANXIANG。Annexin VSHIYIZHONGLINZHIJIEHEDANBAI,YULINZHIXIANSIANSUANYOUGAODUQINHELI,GUKETONGGUOXIBAOWAICEBAOLUDELINZHIXIANSIANSUANYUDIAOWANGZAOQIXIBAODEBAOMOJIEHE。YINCIAnnexin VBEIZUOWEIJIANCEXIBAOZAOQIDIAOWANGDELINGMINZHIBIAOZHIYI。DIANHUABINGDING(Propidium Iodide, PI)SHIYIZHONGHESUANRANLIAO, TABUNENGTOUGUOWANZHENGDEXIBAOMO,DANDIAOWANGZHONGWANQIDEXIBAOHESIXIBAOYOUYUXIBAOMOTONGTOUXINGDEZENGJIA,PI NENGGOUTOUGUOXIBAOMOERSHIXIBAOHERANHONG。YINCIJIANGAnnexin V YUPI PIPEISHIYONG,JIUKEYIJIANGCHUYUBUTONGDIAOWANGSHIQIDEXIBAOQUFENKAILAI。

产品组分
 25 Tests50 Tests100 Tests
AnnexinV-FITC125μl250μl500μl
10×Binding Buffer1.5ml2.5ml5ml
Propidium Iodide125μl250μl500μl
性能
保存方法4℃保存6个月;避免反复冻融。
操作步骤贴壁细胞需用 0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加 2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用 1×PBS或 1×binding buffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1) 用去离子水将 10×Binding Buffer 稀释成 1×Binding Buffer;
(2) 细胞收集:悬浮细胞收集:离心 5 分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后( 注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC 的结合),在室温中,2000rpm 离心 5~10 分钟,收集细胞;
(3) 细胞洗涤:用预冷 1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm 离心 5~10分钟,弃上清洗涤细胞;
(4) 加入 300μL 的 1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5) Annexin V-FITC 标记:加入 5μL 的 Annexin V-FITC 混匀后,避光,室温孵育 15 分钟;
(6) PI 标记:上机前 5 分钟再加入 5μL 的 PI 染色。
(7) 上机前,补加 200μL 的 1×Binding Buffer。
用法说明(1) 使用前低速离心,以免液体积存管盖和管壁;
(2) 本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(3) PI(propidium iodide,溴化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(4) Annexin V-FITC 和 PI 是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(5) 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在 4℃下操作,以免影响细胞状态。
(6) 在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免 PBS 残留,有可能会影响实验结果。
(7) 为防止荧光衰变,宜在 1 小时内进行流式检测。
(8) PI 染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC 染色,zui短可在上机前 5 分钟再加入 PI 染色。

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